恋上你看书网 www.630book.io，最快更新检验与临床医护最新章节！
目前已确定的病毒性肝炎病原体有5种，即甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、丁型肝炎病毒(hepatitis Dvlrus，HDV)、戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)、除HBV为双链DAN病毒外，其余均为单链RNA病毒。
抗HAV抗体测定(anti-hepatitis A virus，anti-HAV）
HAV属于小RNA病毒科，为嗜肝RNA病毒，在体内主要在肝细胞内进行复制，通过粪一口途径传播，多数学者认为HAV不存在慢性携带状态。
ELISA法：抗HAV-IgM阴性；抗HAV-IgG阴性或阳性。
血清中抗HAV-IgM在发病1~2w内出现，3m后滴度下降，6m后则不易测出，抗HAV-IgM阳性已被公认为是早期诊断甲型肝炎的指标。抗HAV-IgG出现较抗HAV-IgM稍晚，可长期或终身存在，抗HAV-IgC阳性表示既往感染，但体内已无HAV，是一种保护性抗体，可用于检测机体或注射甲肝疫苗后是否具有对HAV的免疫力以及流行病学调查。
1．ELISA法影响因素较多，标本要防止溶血，因红细胞中含有 过氧化物酶，红细胞裂解后造成标本溶血，易造成假阳性。
2．要注意hook效应，即标本含量过高时，由于抗原一抗体比例不合适，易出现假阴性结果。
3．抗心律失常药物，如普鲁卡因胺、肼苯达嗪，异烟肼，苯妥英钠，保泰松等药物可引起假阳性。
4．洗涤次数要适当，防止洗涤不彻底致假阳性或洗涤过多致假阴性，要严格按照试剂盒说明书要求进行操作。
乙型肝炎病毒(HBV)病原学指标测定
HBV属于有包膜的嗜肝DNA病毒科，血循环中与HBV有关的颗粒从形态上至少可分为三类：1小球形颗粒并非完整的HBV，而是病毒的外壳（或称包膜），由脂蛋白构成，是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的主要成分，HBsAg由于在肝细胞内参与装配Dane颗粒后过剩，游离于外周血，本身无传染性。2管形颗粒实际为一串聚合的小球形颗粒，直径与小球形颗粒相近，具有HBsAg特性。
3大球形颗粒即完整的HBv，又称为Dane颗粒，由外壳和核壳组成。核壳内古有环状双股DNA、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)、e抗原(HBeAg)等，是病毒复制的主体。
HBV主要通过血液途径传播，也可通过母婴等途径传播。一般机体感染HBV后产生3种抗原抗体系统：HBsAg和乙型肝炎表面抗体(抗HBs)、HBeAg和乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、HBcAg和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)。
乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antlgen，HBsAg)
HBsAg存在于HBV的外壳，是一种糖蛋白，为大、小球形颗粒和管状颗粒所共有。HBsAg的抗原性较复杂，采用血清学方法分类古有5种不同的抗原表位，分别为a、d、y、w、r'其中a属于特异性共同抗原决定簇。目前已知有10种亚型，最常见的主要有adr、adw、ayw、ayr等4种，各亚型分布有明显的地区性，我国长江以北 以adr为主，长江以南以adr和adw为主，新疆、西藏、内蒙古等少数民族地区主要为ayw，因此HBsAg亚型对乙型肝炎流行病学调查和预防有一定意义。
ELISA法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
HBsAg -般在感染HBV后1~2m内出现于血清中，短时在2w内即能够检出，可维持数周、数月、数年以至长期携带。HBsAg虽然本身不具有传染性，但由于其常与HBV同时存在，因此HB-sAg阳性时常被用作传染性的标志之一。HBsAg阳性见于乙肝潜伏期和急性期、慢迁肝、慢活肝、肝硬化、肝癌、慢性HBsAg携带者等。血清HBsAg仅为HBV感染的标志，不反映有无复制、复制程度、传染性强弱及预后等情况。
乙型肝炎病毒表面抗体／抗-HBs (hepatitis B virus surface antibody．HBsAb)
抗-HBs是机体针对HBsAg产生的一种保护性抗体，表明对HBV具有一定免疫力。一般情况下，抗-HBs在HBsAg消失后出现，多为IgG，少数患者中有IgM，是疾病恢复的开始，可持续多年，其滴度与特异性保护作用相关。
ELISA、法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中EUSA法。
抗HBs阳性见于既往感染HBV现已恢复，且对HBV有一定免疫力，接种乙肝疫苗后，仅出现单项抗-HBs阳性；被动性获得 抗-HBS抗体，如注射特异性Ig或输血等。
抗-HBs和HBsAg可同时出现在HBV感染恢复期，此时 HBsAg尚未消失，而抗HBs已产生；或是s区基因发生变异，野株 抗-HBs不能将其中和清除；或是抗-HBs阳性者感染了免疫逃逸 株。HBsAg、抗-HBs和抗-HBc同时存在多见于暴发性肝炎患者。
乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen．HBeAg) HBeAg位于HBV的核心部分，是一种可溶性抗原，由感染的 肝细胞分泌入血，在血中可游离存在。
ELISA法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
1．急性HBV感染时HBeAg出现稍晚于HBsAg，消失先于 HBsAg，长期存在提示病情趋于慢性化。在慢性HBV感染时 HBeAg是主要的免疫耐受因子，大部分情况下HBeAg存在表示患 者处于高感染低应答状态。
2．HBeAg阳性常见于HBsAg阳性者，患者血清中含有较多的 HBV颗粒，由于HBeAg与HBV DNA密切相关，因此是HBV复制 活跃且有较强传染性的标志；HBeAg持续阳性的乙肝患者易转为 慢肝，HBeAg和HBsAg同时阳性的孕妇可发生HBV母婴垂直传 播。
乙型肝炎病毒e抗体，抗-HBe(hepatitis B virus e antibody， HBeAb)
抗-HBe是在HBeAg消失后，机体所产生的一种非保护性抗 体，抗-HBe阳转表示病毒复制多处于静止状态，但并不代表病毒 复制停止或无传染性，20%~50%患者仍可检测到HBV DNA。部分 患者可能由于前C区基因变异，导致不能形成HBeAg所致，一般情况下抗- HBe和HBeAg不会同时存在。抗- HBe出现早于抗-HBs，检出抗-Hbe提示传染性明显降低或相对降低。
ELISA法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
1．抗-HBe出现的快慢与肝炎转归有关。在乙肝急性期出现抗-HBe，易发展为慢性乙肝；慢性活动肝炎出现抗-HBe可能进展为肝硬化；若HBsAg阳性伴有抗-HBe，且ALT升高，须注意原发性肝癌的可能性。
2．抗-HBe阳性常伴抗-HBc阳性，检出率在慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者有逐渐递增的现象，提示多数患者HBV感染时间较长。
乙型肝炎病毒核心抗体，抗-HBc(hepatitis B virus core anti-body，HBcAb)
HBcAg是位于HBV的核心部分，主要存在于被感染肝细胞的细胞核内，游离HBcAg在血清中含量极少，检测比较繁琐，一般不作为常规测定。抗-HBc是针对HBcAg而产生的非保护性抗体，主要包括抗HBc-IgM、抗HBc-IgG、抗HBc-IgA等三型，目前临床常检测总抗-HBco
ELISA法：阴性。
抗HBc-IgM是感染HBV后，血中最早出现的特异性抗体。急性期滴度升高，是诊断急性乙肝、判断病毒复制活跃及具有强传染性的指标；另外抗HBc-IgM阳性还见于慢活肝。抗HBc-IgG在感染HBV后Im左右开始升高，临床上测定总抗-HBc主要反映的 是抗HBc-IgG水平，高滴度表明HBV正在感染与复制；低滴度则表明既往感染，体内持续时间长，具有流行病学意义。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法，此外由于抗HBc-IgM的检测受类风湿因子影响较大，低滴度抗HBc-IgM时，应注意鉴别是为假阳性。
HBV前S1(Pre-S1)和抗前S1(anti-Pre-S1)抗体
Pre-S1是HBV外膜蛋白成分，通常连接在Pre-Sz蛋白的氨基末端，Pre-Si第21~47位氨基酸为肝细胞膜受体．HBV可通过此受体黏附于肝细胞膜上，而进入肝细胞。Pre-Si抗原性较强，可刺激机体产生抗Pre-Si抗体。
ELISA法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
Pre-S1阳性提示病毒复制活跃，具有较强传染性；抗Pre-S1抗体是HBV的中和抗体，机体较早出现表示预后良好。抗Pre-S1抗体阳性见于急性乙肝恢复期，提示HBV正在或已被清除。
HBV前S2(Pre-S2)和抗前S2抗体(anti-Pre-S2)
Pre-S2是HBV外膜蛋白成分，其C末端直接与HBsAg的N末端相连，Pre-S2N端109~133位氨基酸为聚合人血清白蛋白受体，可与聚合人血清白蛋白结合。人肝细胞膜上也有聚合人血清白蛋白受体，因此HBV可通过病毒受体一聚合人血清白蛋白一肝细胞膜受体黏附于肝细胞膜，成为HBV侵入肝细胞的主要结构组分之一。 Pre-S2蛋白抗原性较强，刺激机体可产生抗Pre-S2抗体。
ELISA法：阴性。
Pre-S2阳性提示病毒复制活跃，具有传染性；抗Pre-S2抗体是HBV的中和抗体，阳性时表示病情好转，较早出现是预后良好的指标，特别是对于急性乙肝的预后有重要意义。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
血清HBV-DNA荧光定量PCR测定
荧光定量PCR法：<l.Ox103拷贝/ml。
血清HBV-DNA检测结果与乙肝五项指标的关系：
1．HBV-DNA与HBsAg 一般HBsAg阳性时，HBV-DNA常阳性；但在HBsAg含量极低采用ELISA法检测不出时，可能会出现HBsAg阴性而HBV-DNA阳性的情况；或是患者正处于HBV感染早期，机体乙肝五项标志物尚未产生，但由于PCR检测具有极高的灵敏度，HBV-DNA含量很低也可检出。
2．HBV-DNA与抗-HBs HBV感染恢复期抗-HBs呈阳性，血清HBV-DNA -般为阴性，但少数患者特别是在肝组织HBV-DNA含量很高时，也可为阳性，提示体内HBV尚未完全被清除。
3．HBV-DNA与HBeAg、抗-HBe、抗-HBc HBeAg阳性时HBV-DNA几近全部为阳性；HBeAg阴性、抗-HBe和抗—HBc阳性时，说明HBV复制减弱，其HBV-DNA阳性检出率仍可高达80%，患者具有传染性。
除此之外还用于乙肝患者抗病毒药物的疗效观察、献血员筛查、血液制品及乙肝疫苗安全性评价。
PCR技术灵敏度很高，可由于实验操作不当、实验室设置不规范、消毒处理不彻底、标本收集不符合要求等造成污染，致使结果 出现假阳性。因此必须严格按照PCR实验室要求进行操作，采血使用一次性试管，标本室温放置不能超过6h，所用物品必须高压灭菌等。血清HBV-DNA测定是评价HBV感染和复制最直接、最灵敏、最特异的指标，也是观察乙肝患者有无传染性最可靠的方法。
抗丙型肝炎抗体(anti-hepatitis C virus，anti-HC)
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)属于黄病毒科丙型肝炎病毒属，是一种直径为30～60nm的球形颗粒，外有脂质外壳、囊膜和棘突结构，内有由核心蛋白和核酸组成的核衣壳。
ELISA法：阴性。
抗HCV分为抗HCV-IgM和抗HCV-IgG，均为非保护性抗体，目前临床上检测的为总抗体，抗HCV阳性即是HCV感染的重要标志。抗HCV-IgM阳性见于急性HCV感染，一般持续1—3m，是诊断HCV早期感染、病毒复制和传染性的指标，若持续阳性则提示病情易转为慢性；抗HCV-IgG出现晚于抗HCV-IgM，抗HCV-IgG阳性表示体内有HCV感染，但不能作为早期诊断指标，低滴度抗HCV-IgG提示病毒处于静止状态，高滴度提示病毒复制活跃。
抗HCV-IgM的检测影响因素较多，如球蛋白、类风湿因子等，稳定性不如抗HCV-IgG。
丁型肝炎病毒抗原测定(hepatitis D virus antigen．HDVAg)和丁型肝炎病毒抗体测定(hepatitis D virus antibody，anti-HDV)
HDV是一种缺陷的单股负链RNA病毒，呈球形，其复制需依赖于HBV的存在，包括以HBsAg作为外壳，核心为HDVAg和HDV-RNA，只有与HBV共存才能感染患者。HDVAg是HDV唯一 的抗原成分，因此仅一个血清型，刺激机体所产生的抗HDV不是保护性抗体。临床诊断HDV感染主要依据为血清HDAg、抗HDV-IgM、抗HDV-IgG测定。
ELISA法：阴性。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法。
HDVAg：HDV急性感染早期出现，但很快下降，一般1~2w即难以检测到；慢性感染患者血清中HDVAg可持续阳性。短期内阴转预后较好，持续阳性表示肝损害严重，预后欠佳。
抗HDV-IgM：抗HDV-IgM出现较早，但持续时间较短，用于急性感染早期诊断；抗HDV-IgG：只能在HBsAg阳性患者中检出，是诊断慢性HDV感染的可靠指标，急性期时滴度低，慢性感染滴度高，且HDV被清除后仍可持续多年。重叠感染HBV和HDV时，常表现为抗HBc-IgM阴性、抗HDVlgM和抗HBclgG阳性，提示患者可能发展为肝硬化，且进展快。
戊型肝炎病毒抗体测定(anti-hepatitis E virus，anti-HEV) HEV是引起肠道传播的戊型肝炎之病原体，传播方式及临床表现与甲肝相似，主要流行于亚洲、非洲、墨西哥等国家和地区，常通过饮用被污染的水源而导致戊肝暴发流行，散发病例分布于世界各地。
HEV为20面对称体球形颗粒，直径27~34nm，是一种无包膜RNA病毒，在核苷酸和氨基酸水平高度同源性的基础上，具大鼠等动物中分离到HEV样病毒，提示HEV为人畜共患疾病。
ELISA法：阴性。
急性期患者血清中可检出抗HEV-IgM，持续2~3m；恢复期可检出抗HEV-IgG，持续约1y，提示戊肝病后免疫不能持久。戊肝为自限性疾病，一般不会转为慢性，但一部分患者，尤其是妊娠期若合并戊肝时，易发展为重症肝炎，可导致流产或死亡，病死率高达20%—30%。HBV感染者重叠感染HEV也易发展为重症肝炎。
参见抗HAV抗体测定中ELISA法